دانشگاه پیام نور فصلنامه علمی زیست شناسی جانوری تجربی 2322-2387 مقالات آماده انتشار 2015 02 20 Examined the expression of several genes involved in cancer in several different cancer cell lines by RT-PCR بررسی میزان بیان تعدادی از ژن‎های دخیل در سرطان در چند رده سلول سرطانی مختلف به روش RT-PCR 1 12 1621 FA Journal Article 2014 05 25 Abstract <br />The altered or mutated forms of genes known as proto-oncogenes are responsible for promoting cell growth and uncontrolled cell proliferation. An accumulation of many mutations in different and specific genes,over time is required to cause cancer. The pattern of gene expression, also called molecular signature is unique to a particular class of tumor or tumor cell. This paper describes the latest technique for monitoring the expression of a panel of cancer-specific genes. The PCR technique combines the quantitative performance of SYBR® Green-based real-time PCR is widely used for gene profiling. This technique is cost-effective, easy-to-use, and focuses only on the genes that you desire. In this study the expression of our target genes were quantitatively determined in five human cancer cell lines. We selected gene β-actin as our reference gene. Cells were lysed and the mRNAs were extracted using the RNA Purification Kit and cleaned up with Qiagen RNeasy spin columns. The first-strand cDNA was synthesized according to the High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit protocol. RT-PCR were performed with Gene Expression Assays in an AB step one plus Sequence Detection System. Briefly the expression of p53 was high in both breast cancer cell lines, MCF7, T47-D and lung cancer cells, A549. Src expression was higher in prostate cell line, PC3 and lung cancer cells, A549. Meanwhile SKOV3 (ovarian cancer cell line) showed high expression of her-2 gene.  The results clearly show that the expression pattern of this panel of genes was unique to almost every cell line examined. چکیده <br />فرم تغییریافته و یا جهش‎یافته ژن‎ها یا همان پروتو انکوژن‎ها، مسئول ترویج رشد و تکثیر کنترل‎نشده سلولی می‎باشند. تجمع جهش در ژن‎های مختلف و خاص، در طول زمان منجر به سرطان می‎شود. الگوی بیان ژن (امضا مولکولی)، برای هر کلاس از سلول‎های توموری اختصاصی است. این مقاله آخرین روش نظارت بر بیان یک پانل از ژن‎های خاص سرطانی را شرح می‎دهد. روش real-time PCR براساس عملکرد کمی رنگ SYBR GReen، به‎طور وسیعی برای پروفایل ژن استفاده می‎شود. این روش آسان و مقرون به­صرفه است و تنها بر روی ژن‎های مورد نظر تمرکز می‎کند. در این مطالعه میزان بیان ژن‎های موردنظر ما در پنج رده سلول‎های سرطانی انسانی به طور کمی اندازه‎گیری شد. ما ژن بتا-اکتین را به­عنوان ژن مرجع در نظر گرفتیم. سلول‎ها لیز شدند و mRNA با استفاده از کیت RNA Purification و ستون­هایspin  QIAGEN RNeasy استخراج گردید. رشته اول cDNA با استفاده از کیتHigh capacity cDNA Reverse transcription سنتز و میزان بیان ژن‎ها به وسیله دستگاهreal-timePCR  AB step one plus  اندازه گیری شد.به طور خلاصه بیان ژن p53 در هر دو رده سلول سرطان پستان، MCF7 و T47-D و سرطان ریه، A549 بالا بود. بیان src در رده سرطان پروستات، PC3 بالاتر بود. همین‎طور SKOV3 (سرطان تخمدان) بیان بالای ژن HER-2 را نشان داد. نتایج به وضوح نشان می‎دهد که الگوی بیان این پانل از ژن‎ها، در هر رده سلولی تقریباً منحصر به فرد است . <br />  https://eab.journals.pnu.ac.ir/article_1621_40290223e8333bd5e1c68c64a73138f8.pdf